1． 所需要的溶液：

Buffer A：50mM Tris-HCl—0.1mM PMSF(pH 8.0) 100ml

5 ml 1M Tris-HCl (8.0)

0.01M PMSF

Buffer B: 0.35M NaCl

Buffer C: 1.5mM NaCl—0.15mM 柠檬酸钠

Buffer D；

2． 步骤：

1． 提前一个小时将核诱导调亡。

100μl 提取物（S150）

3μl 细胞色素 C

20μl 小鼠肝核

23℃左右， 1.0-1.5小时

在反应的过程中，用DAPI染色观察调亡的效果，在合适的时间终止反应。

2． 在诱导调亡的反应体系和20μl的正常的肝核中各加入0.9ml和1ml的Buffer A溶液。

3700rpm (TOMY) 4℃ 10min

重悬于1ml Buffer A中，（取2μl 样品和2μl DAPI在显微镜下观察）3700rpm (TOMY) 4℃ 10min

重悬于1ml Buffer B中，（取2μl 样品和2μl DAPI在显微镜下观察）3700rpm (TOMY) 4℃ 10min

重悬于1ml Buffer C中，（取2μl 样品和2μl DAPI在显微镜下观察）4200rpm (TOMY) 4℃ 10min

重悬于1ml Buffer C中，（取2μl 样品和2μl DAPI在显微镜下观察）4200rpm (TOMY) 4℃ 10min

重悬于1ml Buffer C中，（取2μl 样品和2μl DAPI在显微镜下观察）4200rpm (TOMY) 4℃ 10min

得到染色质沉淀，溶于50μl Buffer D中。