干细胞研发服务

干细胞研发服务

干细胞研发是一项技术性和经验性极强的工作,对于研究者来说是一项长时间、高消耗 的投入。很多研究者用几 个月甚至几年的时间,投入大量的精力和费用,却得不到高质量的干细胞;即使得到干细胞也才仅仅实现了第一步, 即建立一个科研工具。 因此,我们建议您把资源和精力投入到您更关注的科学实验中去,而把这种费时、费力的干 细胞研发、培养工作交给我们完成。一方面您可以在我们公司选择标准的干细胞产品使用,另一方面如果您需要我们 公司尚未收录的品种,我们也可以按照您提供的实验方案和参考文献,利用我们公司成熟的干细胞技术和经验,为您 完成从干细胞原代提取到检测方法研究的一系列工作,从而低成本、高效率低获得您所需要的干细胞科研工具。

干细胞的原代提取

干细胞的实验在当今的生物学研究中占有非常重要的地位,我们公司为您提供干细胞实验方面的各种技术服务。

  • 1.骨髓间质干细胞
  • 目前常用的分离MSC的方法有密度梯度离心法和全骨髓贴壁法。全骨髓贴壁法的原理是根据间质干细胞在 低血清培养基中有贴壁优势特性,定期换液除去不贴壁细胞,从而达到纯化与扩增间质干细胞的目的。我们公司分离 培养大鼠骨髓间质干细胞大致步骤如下:
      (1)取大鼠股骨和胫骨,以完全培养基冲洗股骨和胫骨骨髓,转移至离心管中,离心,去上清;
      (2)大鼠骨髓间质干细胞培养基重悬,接种培养;
      (3)原代培养36h全液量换液,去除未贴壁的造血细胞,以后每3天换液一次,直到细胞80%-90%融合传代。
  • 2. 脂肪间质干细胞
    我们公司分离培养脂肪干细胞主要是通过胶原酶进行消化,获得细胞悬液。分离培养大鼠脂肪间质干细胞的 大致步骤如下:
      (1)取腹股沟处脂肪,充分剪碎;
      (2)加入胶原酶,将其转移至离心管中进行消化30分钟,加入培养基终止消化;
      (3)离心,大鼠脂肪间质干细胞培养基重悬,接种至培养瓶中。
  • 3. 胚胎干细胞

    免疫学法是较为常用的分离方法,它可选择性地杀死囊胚外层的滋养层细胞,而仅保留ICM。它的原理是 先将胚泡与抗小鼠的血清共同孵化一段时间后,然后加入补体,在补体的作用下,外层的滋养细胞发生溶解,而ICM 则不受影响。

  • 4. 神经干细胞

    目前,神经干细胞的分离方法主要有三种:无血清培养基自然筛选法、流式细胞术分选法、免疫磁珠分 选法。我们公司采用的是无血清自然筛选法。 无血清培养基自然筛选法是迄今应用最为广泛,也是最简单和容易操作且行之有效的方法。其原理是利用特殊的培养 基使成熟的神经细胞无法较长时间地成活,而分离筛选出能够在该培养条件下存活并繁殖的神经干细胞群体。

    我们公司分离培养小鼠神经干细胞的大致步骤如下:

      (1)取胎脑;
      (2)用吸管吹吸使细胞分散均匀;
      (3)加小鼠神经干完全培养基培养

培养条件的探索和优化

针对您的实验要求为您提供各种细胞的培养条件的探索和优化。

干细胞传代培养

可为您实现干细胞传代培养,为您节省宝贵的时间。

纯化

干细胞的实验在当今的生物学研究中占有非常重要的地位,我们公司为您提供干细胞实验方面的各种技术服务。 体外实验技术以识别干细胞表面标记物作为基础,如CD34、AC133、STRO-1和神经营养素受体p75等已经用于干细胞的 纯化实验,包括细胞淘选、荧光激活细胞分类、免疫磁性选择和免疫吸附柱分离等。

冻存及复苏

干细胞的实验在当今的生物学研究中占有非常重要的地位,我们公司为您提供干细胞实验方面的各种技术服务。 细胞暂时不用或细胞保种是一般是将细胞保存在液氮中,用这个方法既可以减少频繁传代中细胞被污染的机 会,而且也同时减少细胞变异的机会。液氮的温度是-196,细胞在其中的储存时间几乎是无限的。

冻存的大致步骤:

    (1)取对数生长期细胞,冻存前24h换液;
    (2)制备成细胞悬液,计数,离心,去上清;
    (3)冻存液重悬,分装至冻存管中,放入冻存盒中,-80℃冰箱放置24h,次日放入液氮中。

检测方法研究

可根据您的实验要求为您提供各种检测鉴定方法。

干细胞常规检测

  • · 克隆形成率
  • · 生长曲线
  • · 核型分析

干细胞鉴定

干细胞鉴定主要从形态学和功能学两方面来实现。形态学方面的鉴定包括表面形态、表面标记分析——流式鉴定 (FACS) 、免疫组化等。功能学方面的鉴定主要包括增殖能力(自我更新能力) 和分化能力等鉴定,ES鉴定包括畸 胎瘤实验。

    • · 成骨诱导分化
      · 成脂诱导分化
      · 成软骨诱导分化
      · 畸胎瘤实验:
  • 表面标记分析——流式鉴定(FACS) :可提供常用间质干细胞表面标记检测服务

    成瘤是ES的特性,因此畸胎瘤实验是鉴定ES的一项重要手段,可以提供人及小鼠ES的小鼠畸胎瘤实验。

    干细胞扩增服务

    低代数的干细胞需要频繁提取原代来获得,因此数量少、成本高,而且因为频繁地提取原代细胞, 各批细胞之间 受到实验动物个体差异等因素的影响,质量差别很大。事实证明,低代数干细胞并不是每个实验所必须的,很多实验 可以使用校高代数的细胞来完成。 然而,多数实验室限于实验条件、技术和经验匮乏等原因,难以实现干细胞的多 代扩增,只能承受比较高昂的成本。而我们公司却可以利用自身的优势,为您提 供个性化的细胞扩增定制服务,让 您低成本、高效率低获取您所期望的质量和数量的干细胞。

    干细胞定向诱导分化

    干细胞定向诱导分化一方面是干细胞鉴定的主要方法,另一方面也是干细胞功能学研究的主要途径。我们公司可 以 按照您提供的诱导试剂和诱导方法为您完成特定的干细胞诱导实验,也可以按照您的目的和要求,在各种干细胞 诱导实验,也可以按照您的目的和要求,在各种干细 胞诱导途径中为您探索出一套相对完善的方法。

    干细胞转基因

    有成熟的干细胞平台和分子生物学平台,可以提供慢病毒、腺病毒等多种载体转染系统,准确地将您的目的基因 和示踪基因转染到目的细胞中,得到稳定或瞬时表达目的基因和示踪基因的干细胞。

 
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