在过去二十年中, 重组蛋白（r-蛋白），特别是用于结构-功能分析的已纯化蛋白，在生物制药学领域的应用日益广泛。由于应用于该领域的r-蛋白基本上均需要翻译后修饰，以获得与天然分子相同的生物活性，而哺乳动物细胞自身具备蛋白折叠和翻译后修饰的功能，因此很多客户选择哺乳动物细胞蛋白表达系统，表达高质量的r-蛋白。
如果在您的实验过程中，出现关键性蛋白折叠问题或E.coli在充裕的时间内仍无法表达蛋白，或表达的蛋白质量不高等问题时，您可以尝试哺乳动物蛋白表达服务。我们的蛋白表达专家能在四周内提供mg级的哺乳动物细胞表达的蛋白 ，帮助您快速获得满意的实验结果。
服务内容：
- 1、 载体构建及改进：
不论是稳定或是瞬时表达，均可将客户的cDNA克隆至客户或本公司提供的哺乳动物细胞表达载体中。如果客户需要，可在每个表达载体中添加分泌信号或标签，以促进亲和层析后蛋白的最终修复。对于更复杂的方案，如：需要翻译后特殊修饰，形成复杂多聚体，多肽内或多肽间形成二硫键，或特殊的糖基化，我们可以推荐定制相关载体。我们还可以帮助客户标记需要的基因、基因片段或与荧光标记相融合（如GFP）。另外，我们能生产并鉴定高效的稳定细胞系，适合客户扩大生产规模以及进行cGMP生产。
- 2、 稳定基因表达符合长期生产需求
整个实验操作流程，从转染，筛选和细胞分离，到评估初步克隆在无血清培养条件下的生产能力和适应性，提供长期稳定及规模可调的蛋白生产根据客户的需求，我们将进行基因扩增，用于氨甲喋呤以及后续克隆及储存。我们也具备全面的遗传学研究能力，以及无论选择的介质是否存在的情况下生产的稳定性。我们提供细胞群储存服务，可用作prebanks预储备, masterbanks主要储备, and working cell banks以及工作元件储备。
- 3、 瞬时表达（TGE）
稳定基因表达是将重组基因插入寄主基因组中，但鉴定及检测重组细胞系是个耗时、昂贵的过程，因此一些客户，尤其是转包合同或需大规模制备最优化细胞系的客户选择快速制备重组蛋白，快速蛋白制备(能提供mg（毫克）级至g（克）级)通过使用哺乳动物细胞TGE满足这些客户的需求。与稳定基因表达相比，TGE主要用于短期内制备r-蛋白，一般在10天内即可快速转染，无需质粒DNA的遗传性选择。我们的瞬时表达使用悬浮细胞，能轻松表达毫升至100L的蛋白。适合的表达载体构建完成四周左右，我们就能交付给客户表达产物：细胞培养液收集物或重组蛋白。如果客户需要，本公司能将客户的目的基因，克隆入专为TGE系统所设计的高效表达载体中。
- 4、 工艺过程放大与规模培养
我们能优化表达过程以及表达的产物，并能对增长率,转种率, 细胞群, 以及更改条件，促进特异化生成并测定生产体积等等方面进行全面的分析。同样，我们能按比例降低生产规模，预测细胞表达量。
- 5、 蛋白纯化
蛋白表达后，我们会富集培养液，收集上清或细胞，进行蛋白纯化。常用蛋白纯化方式为亲和柱纯化，同时也提供凝胶过滤、离子交换及疏水层析等纯化方法。初步纯化的蛋白经特殊蛋白酶去除纯化标签后，通过凝胶过滤进一步进行纯化。
- 6、 蛋白鉴定
每个订单完成后，我们的专家将确认交付的产品确实满足客户的需求。一般来说，会选取以下几个或全部检测方法鉴定表达的蛋白：染色后进行SDS-PAGE（十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳）或Native-PAGE(未变性聚丙烯酰胺凝胶电泳)检测，蛋白浓度测定，Western blotting检测，吸收光谱检测，N末端序列测定，质谱分析，核磁共振波谱分析，以及活性检测，亲和层析，离子交换层析，凝胶过滤层析，疏水层析等方法纯化蛋白。
服务价格及周期：
| 服务内容 | 服务价格 | 服务周期 |
|---|---|---|
| 瞬时转染细胞，进行蛋白表达及检测 | 4000 | 1-2周 |
| Western blot检测酵母蛋白表达（可选） | 1000 | 1周 |
| ELISA检测表达水平（可选） | 800 | 2-3天 |
| 大规模蛋白表达（可选） | 询价 | 询问 |
服务承诺
- 1、 本公司会在最短的时间内快速完成实验，并为客户提供足量蛋白以满足科研需求。
- 2、 提供完整的实验过程报告，包括电泳图等。
客户须知：
- 1、 客户应确保所提供的实验材料即基因模板或表达质粒的正确性。
- 2、 如基因模板或表达质粒本身具有碱基突变，由此造成的实验时间延误、重复实验费用或其它经济损失均由客户承担。